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簡要描述：p-AKT,小鼠磷酸化AKT蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠磷酸化AKT蛋白（p-AKT）的含量。
產(chǎn)品型號：
所屬分類：小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒
更新時間：2022-08-30
p-AKT,小鼠磷酸化AKT蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠磷酸化AKT蛋白（p-AKT）的含量。
l 有效期：6個月
l 保存條件：2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠磷酸化AKT蛋白（p-AKT）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠磷酸化AKT蛋白（p-AKT）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
p-AKT,小鼠磷酸化AKT蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟：
大部分ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。一般說來，在5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合，使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需－20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。
抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。
1.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。
2.在使用微量加樣器時，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3.吸取液體時速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染，一則細菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些細菌的內(nèi)源性酶，如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。1．5 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。
5.液體全部加入酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應(yīng)。
6.孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板，防止水分蒸發(fā)，以防曲線不成線性。
7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同，酶標(biāo)板只要取出所需量。
8.由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。
要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色
9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10.檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開，將其預(yù)熱30min以上。
11.底物為TMB，避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
12.孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。
13.要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。
14.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。
15.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
16.沒有去離子水或雙蒸水時，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來水。
17.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
代測相關(guān)信息
一、代測范圍
1、本公司公布的試劑盒，可以提供代測服務(wù)。
2、本公司上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測定，費用等相關(guān)信息咨詢。
二、公司責(zé)任
1、對于客戶提供的樣品和要測定的指標(biāo)，及時提供規(guī)范的檢測報告，確保數(shù)據(jù)真實可靠。未經(jīng)客戶允許，不得相關(guān)信息透露給第三方。
2、對于公司上列出的試劑盒測定指標(biāo)，我們將在收到樣品之日起13個工作日內(nèi)提供規(guī)范的檢測報告；反之，提供檢測報告的時間由雙方協(xié)商決定。
3、本公司的檢測報告僅對收到的樣品負責(zé)。為了確保測定結(jié)果有效，請客戶在送檢前與本公司客服人員溝通，并且按照要求做好樣品的數(shù)量、標(biāo)簽和寄送等相關(guān)事宜。
4、客戶如果對測定結(jié)果不滿意，務(wù)必在收到檢測報告之日起起5個工作日內(nèi)與本公司客服人員，商定解決辦法。
5、在收到客戶檢測費起5個工作日內(nèi)快遞寄送加蓋公章的紙質(zhì)檢測報告和發(fā)票。
三、客戶責(zé)任
1、提供樣品的性質(zhì)（物種和組織等）和處理狀況（有無特殊的化學(xué)處理等），確保樣品數(shù)量和標(biāo)簽無誤，以符合要求的方式進行包裝和寄送（注意加足夠的冰袋冷藏，特別嬌貴的樣品請用干冰）。
2、及時付款。一般在寄送樣品時付費用的70%，收到電子版檢測報告，確認無誤后付剩下的30%。如有特殊情況需雙方協(xié)商決定。
3、以上單個樣品測定價格包括預(yù)測費用、試劑費用、人工費用和數(shù)據(jù)處理費用以及蛋白質(zhì)含量測定費用。由于統(tǒng)計處理需要，一般處理每個樣品應(yīng)該至少測定三次（強烈建議）。如果樣品中已經(jīng)包括三次或三次以上重復(fù)，或者用戶不需要重復(fù)測定，請用戶聲明。如果測定樣品數(shù)量很多，可以在測定的總費用上進行適當(dāng)?shù)臏p免。 四、代測的優(yōu)勢
1、將要測定的樣品都是有研發(fā)該試劑盒的專家全權(quán)負責(zé)的，因此可以確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2、節(jié)省客戶的寶貴時間和精力。
3、交給我們代測，您可以不必為操作經(jīng)驗的不成熟和儀器的缺乏而苦惱。
五、附加免費服務(wù)
1、根據(jù)客戶研究目的，免費提供專業(yè)的檢測意見和建議。
2、免費提供樣品蛋白質(zhì)含量測定。
3、免費提供測定結(jié)果分析，包括顯著性差異、指標(biāo)變化的生理生化意義和相關(guān)指標(biāo)變化之間的關(guān)系等。
為何選擇本公司“”？
我司是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的生物技術(shù)公司，公司生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證，含量高，能夠給實驗帶來準(zhǔn)確的結(jié)果。同時試劑隨貨附帶質(zhì)檢報告和圖譜，能為用戶更好的解決各種疑難問題。如有需要可我司銷售人員，我們將竭誠為您服務(wù)。
