時(shí)間過(guò)的真快啊！今天是本年度的zui后一個(gè)周一了，上海恒遠(yuǎn)技術(shù)部根據(jù)產(chǎn)品的原理與特性，分析解說(shuō)2016ELISA試劑盒檢測(cè)方法：
     首先我們要從抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定、抗原濃度的優(yōu)化、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化、酶標(biāo)抗體稀釋度的優(yōu)化、底物液的優(yōu)化、底物作用時(shí)間的優(yōu)化，然后比較結(jié)果。
     1. 抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定
     試劑盒收集*峰即為酶標(biāo)抗體峰。標(biāo)記完后用紫外分光光度計(jì)在分別在280nm、及403nm處測(cè)定酶標(biāo)記物的A值，計(jì)算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結(jié)合率以及標(biāo)記率。
     2. 包被用緩沖液及zui適包被抗原濃度的優(yōu)化
     ① 包被緩沖液的優(yōu)化：三種緩沖液作為包被液，抗原包被濃度為5ug/ml，及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1：400及1：300，用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析，選擇*的包被緩沖液系統(tǒng)。
     ② zui適抗原包被濃度的優(yōu)化：顯色的強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與包被的抗原量成正比，但隨著包被抗原濃度的增加，顯色的強(qiáng)度反而降低，我們選擇臨界包被值作為包被抗原量。
     3. 封閉液、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化
     ① 封閉液的優(yōu)化：采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法進(jìn)行封閉，其封閉液的組成為：10mM磷酸鹽緩沖液含1%的牛血清白蛋白。
     ② 洗滌液的配制：采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法配制洗滌液。
     4. 酶標(biāo)板保護(hù)液的優(yōu)化
     在封閉完后加入保護(hù)液于4℃冰箱中孵育放置一個(gè)晚上，同時(shí)與未做保護(hù)的酶標(biāo)板進(jìn)行對(duì)照，然后將保護(hù)的及未保護(hù)的酶標(biāo)板置于37烘箱中放置15天，考察保護(hù)液對(duì)酶標(biāo)板的穩(wěn)定性的影響。
     5. 酶標(biāo)抗體稀釋度、保護(hù)液的優(yōu)化
     ① 稀釋度的優(yōu)化：抗原包被濃度為4ug/ml，經(jīng)孵育、洗滌后、顯色終止后，用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析，選擇A值為1.5左右的酶標(biāo)抗體稀釋度為zui適工作濃度。
     ② 保護(hù)液的優(yōu)化：適當(dāng)?shù)木彌_液以及添加無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會(huì)對(duì)對(duì)酶標(biāo)抗體的活性起一定的保護(hù)作用，因此我們?cè)O(shè)計(jì)了一組保護(hù)劑用于保護(hù)酶標(biāo)抗體，與未添加任何糖蛋白的酶標(biāo)抗體做對(duì)照。
      以上就是2016ELISA試劑盒檢測(cè)方法啦，希望能在您的實(shí)驗(yàn)中給予實(shí)際的幫助。非常感謝您在2015對(duì)我司的大力支持，現(xiàn)在2016元旦活動(dòng)進(jìn)行中，采購(gòu)。